二元高壓梯度系統是一種高效、精準的分離分析技術,廣泛應用于多個領域。通過正確使用該系統,可以顯著提高分析的準確性和可靠性,為科研工作者提供強有力的支持。以下是二元高壓梯度系統的使用細節:
1. 系統組成與連接:
- 高壓泵:通常有兩個獨立工作的高壓泵,分別用于輸送不同的溶劑。高壓泵采用雙柱塞桿串聯設計、凸輪驅動、懸浮式柱塞導向及數字脈動阻尼器等,確保輸液脈動小、運行平穩,進口高質量柱塞桿和密封圈提高了其穩定性和耐用性。
- 梯度混合器:位于兩個高壓泵之后,根據預設的梯度程序,自動調整兩種流動相的比例,實現流動相組成的連續變化。其精確控制能保證梯度的精度和重現性。
- 色譜柱:內填充有特定的固定相,與流動相中的樣品組分發生相互作用,使不同組分因相互作用力不同而在色譜柱中的移動速度產生差異,從而實現分離。
- 檢測器:如UV紫外檢測器,用于檢測分離后的組分,提供準確的分析結果。
- 工作站:控制整個系統的運行,包括泵、檢測器、柱溫箱等,具有強大的數據處理功能,可輕松實現泵及檢測器的控制、靈活的報告輸出模式,滿足用戶多角度的使用需求。
2. 操作步驟:
- 開機準備:依次打開計算機、二元高壓梯度系統的電源,等待系統初始化完成。同時檢查溶劑托盤內的溶劑是否充足,各連接管路是否緊密無泄漏。
- 設定參數:在工作站軟件上設置所需的流動相比例、流量、梯度程序、柱溫、檢測波長等參數。例如,根據待分離樣品的性質和分析要求,確定初始流動相比例、梯度變化的時間范圍和斜率等。
- 排氣操作:打開排液閥,以較低的流速排出系統中的空氣,防止空氣對分析結果產生影響。待氣泡排除后,關閉排液閥。
- 平衡系統:以設定的初始流動相比例沖洗系統一段時間,使色譜柱達到平衡狀態。這一步驟對于獲得穩定的基線和準確的分析結果至關重要。
- 進樣分析:將待測樣品通過進樣口注入系統,開始進行分析。在分析過程中,密切觀察工作站軟件上的色譜圖和相關數據,確保分析過程正常進行。
- 清洗維護:分析完成后,用適當的溶劑清洗系統,去除殘留的樣品和流動相,防止污染系統和影響下一次分析。定期對系統進行維護和保養,如更換密封圈、清洗過濾器、校準檢測器等,以保證系統的性能和穩定性。
3. 注意事項:
- 溶劑選擇:根據樣品的性質和分析目的選擇合適的流動相溶劑,確保溶劑的純度和兼容性。同時要注意溶劑的毒性和揮發性,避免對操作人員和環境造成危害。
- 壓力監控:在系統運行過程中,實時監控壓力變化。如果壓力異常升高或波動較大,可能是由于管路堵塞、柱塞桿故障等原因引起的,應立即停止運行,檢查并排除故障。
- 溫度控制:保持柱溫的穩定對于獲得良好的分離效果很重要。柱溫的變化會影響樣品在色譜柱上的保留時間和分離效率,因此要確保柱溫箱的溫度控制準確可靠。
- 梯度精度:二元高壓梯度系統的梯度精度對于復雜樣品的分離至關重要。在使用前應對系統進行梯度校準,確保實際的梯度比例與設定值相符。在分析過程中,避免突然改變梯度條件,以免影響分離效果。